LipoEnter 高效轉染試劑 

貨號：Cat.No: C51500L Size：1.5 ml 

產品介紹

新賽美 LipoEnter 高效轉染試劑是一種新型陽離子脂質體轉染試劑，適合將 DNA 轉染入真核細胞。本試劑具 有低細胞毒性，高轉染效率，重復性好，操作簡單等優點，轉染時血清的存在不影響轉染效率，貼壁細胞 和懸浮細胞都適用。為取得最佳轉染效果，建議轉染時使用不含抗生素培養液，轉染 4-6 h 后可去除轉染液。 

操作步驟 

對大多數細胞來說，可以先以 DNA(μg)與 LipoEnter(μl)比例 1:2~1:3 進行預實驗，根據效果再進行比例優化。 為達到最高的轉染效率和降低細胞毒性的影響，可對 DNA 和 LipoEnter 的比例以及細胞密度進行優化，建議 在 1:0.5~1:5 的范圍內優化 DNA (μg)和 LipoEnter 比例。 一般而言，轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染 效率和表達水平，并能減少細胞毒性。

1. 以 24 孔板為例

貼壁細胞：轉染前一天，用 500μl 不含抗生素培養基接種 0.5 ~2×105 細胞，使之第二天能達到 80-90%融合。 懸浮細胞：在準備 DNA-LipoEnter 復合物之前，用 500 μ l 不含抗生素的培養基接種 4~8×105 細胞即可。

2. 對每個轉染樣品，進行以下操作 

a. 在 eppendorf 管里分別加入 50 μl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium 和 0.8 μg DNA 輕柔混勻(不能渦旋或 離心) ，制成 DNA 稀釋液。 

b. 在另一個 eppendorf 管里分別加入 50μl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium 和 2.0 μl LipoEnter（注意用前 先混勻)，輕柔混勻，制成 LipoEnter 稀釋液 ，室溫靜置 5 分鐘。

c. 將 DNA 稀釋液和 LipoEnter 稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置 20 分鐘，形成 DNA-LipoEnter 復合物。DNA-LipoEnter 復合物在室溫下可穩定存在 6 小時。 

3. 將 DNA-LipoEnter 復合物加入到接種好的細胞中，將培養板輕輕地前后搖動，使復合物分散均勻。 

4. 在 37°C CO2 培養箱中培養 4-6 小時后更換培養基,繼續培養 18~48 小時。 

5. 如果要篩選穩定細胞株，則在轉染 24 小時后將細胞按照 1 :10 或更高的比例接種到新鮮培養基中，第二 天加入選擇性培養基進行篩選。 

保存條件 

4°C 保存，避免冷凍，有效期 18 個月。 

注意事項 

1. 使用高純度 DNA 有助于獲得較高的轉染效率，轉染前細胞必須處于良好的生長狀態。 

2. 需自備不含抗生素的無血清培養液或 Opti-MEM?培養液或普通的 DMEM 培養液。 

3. LipoEnter 不能 vortex 或離心，宜緩慢晃動混勻。 4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。