產品介紹

NCM Stbl3 Competent Cell 是新賽美生物研發的用特殊化學方制備的 Stbl3 感受態細胞， 來源于 HB101 E. coli strain，是慢病毒載體系統推薦使用的菌株，可有效抑制長片段末 端重復區的重組，降低低錯誤重組的概率。轉化效率可達 108-109 菌落數/ug（質粒 pUC19），是實現 DNA 克隆，文庫構建等實驗的理想產品。

產品特色 

? 可實現含有重組序列等不穩定質粒轉化

? 效率高：可達到 108-109 cfu/ug pUC19 DNA

? 穩定性好：-70 度冰箱可保存一年時間

Stbl3 基因型

F–mcrBmrrhsdS20(rB–,mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR) xyl- 5λ--leu mtl-1

操作步驟 

1. 取 100ul 冰浴上融化的 Stbl3 感受態細胞，加入目的 DNA（質粒或者連接產物），輕輕混 勻，在冰浴中靜置 30 分鐘。 

2. 42℃水浴中熱激 30 秒，然后快速將離心管轉移至冰浴中 2 分鐘，該過程不要振蕩離心 管。 

3. 向每個離心管中加入 900ul 無菌的 SOC 或者 LB 培養基（不含抗生素），輕柔地混勻后置 于 37℃，200rpm 搖床上孵育 1 小時，使細菌復蘇。

4. 根據實驗要求，吸取不同體積或者離心濃縮后的已轉化的感受態細胞加入含相應抗生素 的 LB 瓊脂培養基上，將細胞均勻涂開，將平板置于 37℃至液體被稀釋，平板倒置，過夜 培養。 

保存條件 

-70℃保存，干冰運輸，至少 6 個月有效； 

注意事項 

1. 剛化凍的感受態細胞效率最高，避免反復凍融； 2. 轉化整個過程要輕柔，避免移液器吹吸。